Dependencia a colistina debida a la pérdida de lipolisacáridos en Acinetobacter baumannii

Resumen

Motivación: Determinar la causa genotípica de la dependencia a colistina (1) en Acinetobacter baumannii de estirpes seleccionadas resistentes a colistina, el cual es un antibiótico muy utilizado en clínica para combatir cepas múltirresistentes. Estos mutantes presentan una mutación de pérdida de función en genes esenciales para la biosíntesis del lípido A, que forma parte del lipopolisacáridos (LPS). Henry et al. demostraron que estas estirpes sin LPS tienen alterados los niveles de expresión de otros genes que dan lugar, entre otras cosas, al incremento de sistemas de transporte de lipoproteínas, fosfolípidos y exopolisacáridos para compensar la pérdida del LPS en la membrana externa (2). Por tanto, este fenómeno produce la modificación de la membrana con la consecuente resistencia a colistina y un aumento de permeabilidad.
Métodos: Se utilizaron cinco cepas clínicas multirresistentes aisladas de pacientes infectados en las UCIs del hospital Virgen del Rocío, una estirpe tipo sensible. Además, se incluyó una estirpe resistente a colistina con una modificación en el LPS en lugar de ausencia del mismo. Para visualizar la dependencia a colistina, en primer lugar se realizaron ensayos E-test en placas de medio rico con Mueller Hinton Broth (MBHII), usando tiras de colistina. El efecto de dependencia a colistina se estudió en curvas de crecimiento en medio líquido MHBII en agitación a 37ºC en placas multipocillos, comparando el número de ufc/ml de la misma estirpe en ausencia o presencia de colistina a 5 μg/ml.
Resultados: Todas las estipes clínicas presentaron una concentración mínima inhibitoria a colistina >256 μg/ml, mientras que la de la estirpe tipo resistente a colistina fue de 48 μg/ml y la cepa con LPS modificado fue 32 μg/ml. Sólo en las cepas sin LPS se observó un halo de mayor crecimiento alrededor de la tira en comparación a la zona alejada de la misma, lo que indica la dependencia a este antibiótico.
Respecto a la curva de crecimiento, la presencia de colistina aceleró la entrada en fase exponencial en todas las estirpes en comparación al medio rico sin colistina, alcanzando 1,71 veces más crecimiento en colistina a las 24 horas.
Conclusiones: Nuestros resultados muestran que la pérdida de LPS no sólo confiere resistencia a colistina si no que además crea una dependencia a este antibiótico. Sin embargo, este fenómeno de dependencia a colistina no ocurre si la resistencia se ha adquirido por modificación del LPS.